Izolacija in analiza nukleinskih kislin

Opis

Čiščenje, kvantifikacija in pomnoževanje DNK in RNK so pogoste metode, ki se uporabljajo v številnih laboratorijskih postopkih in na različnih področjih. Izolacija visokokakovostnih nukleinskih kislin iz gojenih celic, živalskih ali rastlinskih tkiv, bakterij, telesnih tekočin in drugih vrst vzorcev je ključni prvi korak pri večini eksperimentov genomske analize. Če je kakovost izolirane DNK slaba, lahko to negativno vpliva na vse nadaljnje postopke. Med ekstrakcijo in čiščenjem nukleinskih kislin vzorci običajno preidejo skozi več zaporednih korakov: lizo celic, odstranjevanje nečistoč, vezavo nukleinskih kislin, spiranje ter elucijo očiščene DNK ali RNK. Čistost in izkoristek izolirane nukleinske kisline sta ključna dejavnika za optimalno izvedbo nadaljnjih analiz, kot sta PCR in sekvenciranje. Naša ponudba vključuje vse od ročnih kompletov za izolacijo nukleinskih kislin, avtomatiziranih rešitev v primeru izolacije večjega števila vzorcev naenkrat, (q)PCR/RT-(q)PCR produktov, kloniranja, vektorjev, pripomočkov za sekvenciranje in epigenetiko.

Kloniranje in DNA markerji

• Restrikcijski encimi, T4 DNA-ligaza in kompetentne celice za klasično kloniranje.
• Encimi za spreminjanje nukleinskih kislin in RNA-polimeraze T7, SP6 in T3.
• DNA/RNA markerji in velikostne lestvice za analizo fragmentov.

Vektorji

• Klonirni in T-vektorji za enostavno vstavljanje DNA fragmentov.
• Reporter vektorji z luciferazo za spremljanje aktivnosti genov.
• Vektorji za izražanje beljakovin z različnimi oznakami, kot so His-tag, HaloTag in GFP .

Ekstrakcija nukleinskih kislin

• Izdelki za izolacijo in čiščenje genomske DNA, plazmidne DNA, RNA in celotnih nukleinskih kislin.
• Rešitve za čiščenje in koncentriranje DNA/RNA ter PCR-produktov.

Epigenetika

• Analiza metilacije DNA z metilacijsko občutljivimi encimi in bisulfitnim sekvenciranjem.
• HDAC-Glo™ in SIRT-Glo™ testi za merjenje aktivnosti HDAC in sirtuinov.
• Kinazni sistemi za raziskovanje fosforilacije histonov.

PCR

• Celovite rešitve za PCR, hot-start PCR, long-range PCR, qPCR, RT-PCR in RT-qPCR.
• GoTaq® DNA-polimeraze, master miksi in GoScript™ reverzna transkriptaza.

RNA analize

• Reagenti za RT-PCR, in vitro transkripcijo in RNAi.
• Sistemi RiboMAX in Riboprobe za pripravo RNA.
• RNasin® inhibitor za zaščito RNA pred razgradnjo.

Sekvenciaranje

• Rešitve za NGS pripravo knjižnic, čiščenje in kvantifikacijo DNA.
• Spectrum Compact in ProDye® Terminator Sequencing System za Sangerjevo sekvenciranje.
• Uporaba za potrditev NGS rezultatov in preverjanje genomskih sprememb.

Prednosti

• Širok nabor rešitev za celoten potek analize – Promega ponuja izdelke za različne korake, od izolacije in čiščenja DNK/RNK do kvantifikacije, PCR, qPCR, kloniranja in sekvenciranja. To omogoča sestavo celotnega delovnega procesa znotraj ene produktne ponudbe.
• Visoka kakovost in čistost izoliranih nukleinskih kislin – njihovi sistemi za ekstrakcijo so zasnovani za pridobivanje visokih izkoristkov kakovostne genomske DNK, plazmidne DNK, RNK ali celotnih nukleinskih kislin. To je pomembno predvsem zato, ker lahko kakovost začetnega vzorca pomembno vpliva na uspešnost nadaljnjih analiz
• Različne možnosti glede na velikost laboratorija in število vzorcev – na voljo so ročni sistemi, namizni avtomatizirani sistemi ter rešitve za avtomatizirano ekstrakcijo. Sistem Maxwell® na primer omogoča avtomatizirano čiščenje nukleinskih kislin iz 1–48 vzorcev na zagon, medtem ko so na voljo tudi rešitve za večje število vzorcev.
• Primernost za različne vrste vzorcev – Promega ponuja rešitve za izolacijo DNK/RNK iz krvi, celic, tkiv, rastlin, mikroorganizmov, plazme in drugih materialov kot tudi produkte za bolj zahtevnejše vzorce (FFPE tkiva, ccfDNA).

Aplikacije

• Onkologija – odkrivanje tumorskih mutacij, genetskih sprememb in biomarkerjev, spremljanje bolezni
• Genetika in genetske bolezni – odkrivanje dednih bolezni, mutacij in drugih genetskih različic ter proučevanje njihovega vpliva na zdravje posameznika.
• Populacijska genetika – proučevanje genetske raznolikosti med populacijami, sorodstvenih povezav, evolucije in genetske strukture populacij.
• Molekularna diagnostika – zaznavanje specifičnih genetskih zaporedij, mutacij ali povzročiteljev bolezni za potrebe diagnostike.
• Mikrobiologija in infekcijske bolezni – identifikacija bakterij, virusov, gliv in drugih mikroorganizmov ter določanje njihovih genetskih značilnosti.
• Farmakogenomika in personalizirana medicina – proučevanje povezave med genetskimi značilnostmi posameznika in njegovim odzivom na zdravila, kar omogoča bolj prilagojeno zdravljenje.
• Raziskave izražanja genov – ugotavljanje, kateri geni se izražajo v določenih celicah ali tkivih in kako se njihovo izražanje spreminja glede na različne pogoje.
• Razvoj zdravil in biomedicinske raziskave – proučevanje molekularnih mehanizmov bolezni, identificiranje novih terapevtskih tarč ter preverjanje učinkov potencialnih zdravil.
• Reproduktivna medicina in prenatalna diagnostika – analiza genetskega materiala za odkrivanje kromosomskih in genetskih nepravilnosti ter proučevanje genetskega zdravja zarodka.
• Forenzika – identifikacija posameznikov, ugotavljanje sorodstvenih povezav ter analiza bioloških sledi na podlagi DNK.
• Kmetijstvo in živinoreja – genetska karakterizacija rastlin in živali, selekcija, izboljševanje lastnosti ter odkrivanje genetskih značilnosti, povezanih z odpornostjo, kakovostjo ali produktivnostjo.
• Živilska industrija – identifikacija mikroorganizmov, preverjanje pristnosti živil, odkrivanje alergenov ter ugotavljanje prisotnosti določenih vrst organizmov.
• Okoljska biologija in ekologija – spremljanje mikroorganizmov, biodiverzitete in sprememb v ekosistemih, tudi z uporabo okoljske DNK (eDNA) in metagenomskih analiz.
• Evolucijska biologija in filogenetika – proučevanje sorodstvenih odnosov med organizmi, njihovega izvora in evolucijskega razvoja.
• Biotehnologija – gensko inženirstvo, razvoj bioloških produktov, rekombinantnih proteinov, celičnih sistemov in drugih biotehnoloških aplikacij.

Modeli in specifikacije